跨膜蛋白在基本生理过程中起着重要作用，包括分子运输、信号转导和能量利用等。是目前最主要的药物靶点，占现阶段己知药物靶点的60%以上，以跨膜蛋白为靶点的创新药研发一直是医药领域的研究热点。由于跨膜蛋白具有疏水亲脂的跨膜域，必须借助细胞膜的磷脂双分子层这一特殊环境来维持正确结构、保持生物活性，同时跨膜次数越多其具有的疏水亲脂跨膜区越多，在宿主细胞中表达水平越低，制备难度越大，因此体外制备有活性的跨膜蛋白是目前公认的技术难题。

　　一、跨膜蛋白

　　具有全长完整结构的多次跨膜蛋白在药物研发中具有重要意义。为助力跨膜蛋白靶点药物的开发，华美生物(CUSABIO)在原有大肠杆菌、毕赤酵母、哺乳动物细胞和杆状病毒-昆虫细胞四大表达系统的基础上，开发出表达跨膜蛋白的无细胞和基于哺乳细胞的病毒样颗粒(VLPs)两大核心技术，并成功制备470余种跨膜蛋白，包含CCR8、C5AR1、Claudin-18.2等多个热门靶点。

　　● 多平台验证

　　华美生物(CUSABIO)应用WB技术验证跨膜蛋白特异性，采用功能性ELISA/SPR/FACS等多种蛋白应用分析技术验证跨膜蛋白活性，并通过SEM方法验证跨膜蛋白正确组装，确保给客户提供高活性、高纯度、构象正确的全长跨膜蛋白。

　　WB验证跨膜蛋白特异性

　　功能性ELISA验证跨膜蛋白生物活性

　　经SPR验证跨膜蛋白生物活性

　　SEM验证跨膜蛋白正确组装

　　二、CUSABIO跨膜蛋白技术平台

　　在基因组的众多基因中，有20%~30%的基因编码的是编码膜蛋白。众多的膜蛋白参与了几乎细胞内的每一种生命活动，包括配体-受体结合、信号转导、分子转运、细胞间识别与酶催化等，在生物学研究和药物开发中具有广泛的应用价值。因此，膜蛋白是众多药物研发和临床治疗研究的重要靶点，离子通道、转运蛋白、GPCR和激酶是药物研发中最大的一类药物靶点，现有已获批抗体药物中约40%通过靶向GPCR复合物发挥药理作用。

　　由于其复杂的结构和表达难度，多次跨膜蛋白的研究一直是一项难题。华美生物(CUSABIO)建立了VLPs技术平台、去垢剂技术平台、Nanodisc技术平台三大跨膜表达技术平台，提供多次跨膜蛋白表达服务，致力于解决客户在多次跨膜蛋白研究中的困难，为科学家们提供高质量的重组表达跨膜蛋白，推动生物医学领域的进展。

　　1、三大跨膜表达技术平台的优劣势比较

　　2、服务优势

　　高效的表达策略： 华美生物(CUSABIO)采用三大表达跨膜蛋白表达技术平台，搭配优化的载体，确保多次跨膜蛋白的高效表达;

　　丰富的跨膜蛋白表达经验： 华美生物(CUSABIO)已拥有超过十年的跨膜蛋白表达经验，技术团队经验丰富，已表达超过400+ 种全长多次跨膜蛋白;

　　高质量的表达蛋白： 我们采用严格的质量控制流程，确保提供的表达蛋白具有高纯度和活性，适用于进一步的实验研究;

　　产量高： 无细胞表达系统最高可达5mg/mL，哺乳动物细胞表达系统最高可达100mg/L。

　　3、服务流程

　　4、跨膜蛋白技术平台

　　（1）病毒样颗粒 (VLPs) 技术平台

　　重组人全长SSTR2蛋白（7次跨膜）

　　重组人全长CLDN6蛋白（4次跨膜）

　　（2）去垢剂技术平台

　　重组人全长CCR4蛋白（7次跨膜）

　　（3）Nanodisc技术平台

　　5、Q&A

　　Q：可否详细介绍下几个平台是如何表达及组装跨膜蛋白的？

　　A：VLPs平台——包膜病毒衣壳蛋白表达过程中可以自我组装成纳米颗粒，目的蛋白(跨膜蛋白)表达之后定位在细胞膜上，VLP通过出芽的方式释放出去，释放的过程中会和细胞膜整合(细胞膜上有目的蛋白)，释放后的纳米颗粒(即VLPs颗粒)包膜上会展示跨膜蛋白。

　　去垢剂平台——大肠杆菌无细胞表达，之后用去垢剂溶解纯化。Nanodiscs平台——大肠杆菌无细胞表达过程中添加膜骨架蛋白(MSP)和磷脂分子(DMPC)使其边表达边组装成nanodiscs。

　　Q: 以上所有平台的膜蛋白制备过程中，是否有用到任何的病毒或者病毒载体？

　　A：哺乳包膜VLPs即包膜病毒样颗粒，是由病毒一个或几个结构蛋白自行组装成不含病毒基因组且不能复制、不具有感染能力，只是形态结构上类似完整病毒，并不含有病毒核酸物质，是安全的。现在不少疫苗也会选择该技术，可见其是安全的。

　　Q：Nanodisc平台用的脂质体和膜骨架蛋白分别选择了多少种进行组合，是否针对每个项目优化组合？

　　A：华美生物在前期平台研发阶段尝试了多种膜骨架蛋白和磷脂分子，进行了正交组合尝试，最终筛出了一对最适的膜骨架蛋白和磷脂分子，可成熟针对不同项目。

　　武汉华美生物工程有限公司，成立于2007年12月，是一家集科研、生产、销售为一体的生物高新技术企业，以科研试剂生产、诊断试剂原料供应为核心，致力于为全球来自高等院校、政府研究机构、诊断试剂生产厂家以及生物制药公司的广大客户们提供高质量生物产品。

　　武汉华美生物(CUSABIO)经过18年的积累，华美生物逐步构建了涵盖生物领域科研产品所需的技术体系，包括：基因、重组蛋白、抗体及试剂盒检测产品开发等多个技术平台，依托积累的技术平台体系，华美生物已累计生产出：多物种基因产品13,000余种，重组蛋白13,000余种，跨膜蛋白470余种，多克隆抗体65,000余种，单克隆抗体1,000余种，ELISA检测试剂盒4,000余种，为全球80余个国家、国内2,000余家高校及科研机构的生物基础科研工作提供相关科研试剂产品，全球范围内产品引用文献达25,000余篇。


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